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臨床級(jí)凍存液

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

臨床級(jí)凍存液用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞，并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)。

產(chǎn)品型號(hào)：CP-1

更新時(shí)間：2023-10-24

廠商性質(zhì)：代理商

訪問(wèn)量：2992

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UBIO生物

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貨號(hào)	MS-4601W SMS-4702WS	規(guī)格	1箱
供貨周期	一個(gè)月	主要用途	再生醫(yī)學(xué)、干細(xì)胞庫(kù)、日本細(xì)胞培養(yǎng)中心CPC（Cell Processing Ce
應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥,綜合

　　CP-1細(xì)胞凍存液(臨床級(jí)凍存液)

　　?獲得日本再生醫(yī)學(xué)等產(chǎn)品材料的資格認(rèn)證

　　1.產(chǎn)品從1992年開(kāi)始推廣應(yīng)用

　　2.在日本國(guó)內(nèi)的GMP設(shè)備中生產(chǎn)制造

　　3.進(jìn)行了非臨床實(shí)驗(yàn)

　　5.可以在-80℃的冰箱中冷凍保存

　　6.不含動(dòng)物來(lái)源的成份

　　7.成分公開(kāi)透明

　　8.擁有日本原料藥注冊(cè)證(MF)

　　應(yīng)用實(shí)例

　　I 懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞的冷凍方法

　　II 使用CP-1HG冷凍保存/解凍造血干細(xì)胞的方法

　　III。使用CP-1HG間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存/解凍方法

冷凍保存液的制備

·1.CP-1高等級(jí)，25％HSA，將介質(zhì)冷卻至4℃。

·2.將CP-1高級(jí)6.8 mL，25％HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中，并均勻混合。

·3.即將使用之前，請(qǐng)保存在4℃下。

細(xì)胞冷凍保存

·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞，并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)。

·2.離心除去上清液。

·3.預(yù)先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25％HSA /培養(yǎng)基（冷凍保存液-2的制備），均勻懸浮至1×106細(xì)胞/ mL。

·4.將各1 mL放入冷凍管中，放入冷凍容器中，并在-80°C緩慢冷凍。

·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。

解凍細(xì)胞

·1.事先在離心管中準(zhǔn)備9 mL培養(yǎng)基。

·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管，并在37°C的溫水浴中快速融化。

·3.將所有解凍的細(xì)胞添加到培養(yǎng)基中并離心。

·4.除去上清液，并添加適量的培養(yǎng)基。

·5.在每種使用的細(xì)胞類型的最佳條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

　　IV 評(píng)價(jià)結(jié)果(間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存)

　　V 使用CP-1HG冷凍保存iPS / ES細(xì)胞并進(jìn)行評(píng)估

　　Ⅰ．懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞的冷凍方法

　　Ⅱ．CP-1®High Grade冷凍保存/解凍造血干細(xì)胞的方法Ⅲ．CP-1®High Grade應(yīng)用于間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存/解凍方法

　　冷凍保存液的制備

　　·1.CP-1高等級(jí)，25%HSA，將介質(zhì)冷卻至4℃。

　　·2.將CP-1高級(jí)6.8 mL，25%HSA 3.2 mL和10.0 mL培養(yǎng)基加入離心管中，并均勻混合。

　　·3.即將使用之前，請(qǐng)保存在4℃下。

　　細(xì)胞冷凍保存

　　·1.用剝離溶液收集要冷凍保存的細(xì)胞，并計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)。

　　·2.離心除去上清液。

　　·3.預(yù)先添加已冷卻至4°C的CP-1高品位/ 25%HSA /培養(yǎng)基(冷凍保存液-2的制備)，

　　均勻懸浮至1×106細(xì)胞/ mL。

　　·4.將各1 mL放入冷凍管中，放入冷凍容器中，并在-80°C緩慢冷凍。

　　·5.第二天移至液氮或-150℃的深冷柜中。

　　解凍細(xì)胞

　　·1.事先在離心管中準(zhǔn)備9 mL培養(yǎng)基。

　　·2.從液氮中取出冷凍的冷凍管，并在37°C的溫水浴中快速融化。

　　·3.將所有解凍的細(xì)胞添加到培養(yǎng)基中并離心。

　　·4.除去上清液，并添加適量的培養(yǎng)基。

　　·5.在每種使用的細(xì)胞類型的最佳條件下進(jìn)行培養(yǎng)。

　　Ⅳ．評(píng)價(jià)結(jié)果（間充質(zhì)干細(xì)胞冷凍保存）

　　[目的]關(guān)于有望在將來(lái)用于再生醫(yī)學(xué)的人間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)可以冷凍保存在CP-1高等級(jí)中，并可以通過(guò)廉價(jià)，方便的干冰穩(wěn)定地長(zhǎng)期運(yùn)輸嗎？

　　[方法]將人脂肪來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC-AT)或人骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC-BM)冷凍在CP-1High Grade或?qū)φ罩?下圖中的A)(1 x 106細(xì)胞) / mL)，并儲(chǔ)存在液氮罐中。儲(chǔ)存在液氮罐中后，應(yīng)在假定干冰運(yùn)輸(-80°C·7天，-60°C·3天，60°C·7天)，融化后立即存活率和第二天培養(yǎng)的每種條件下儲(chǔ)存確認(rèn)對(duì)血管的粘附率(粘附率=活細(xì)胞數(shù)/接種的活細(xì)胞數(shù))。

　　[結(jié)果]在所有條件下，融化后的存活率均為90%以上，未觀察到差異(下圖B)。然而，在冷凍的hMSC作為對(duì)照中，解凍后的第二天在-60°C儲(chǔ)存時(shí)觀察到許多未粘附在培養(yǎng)箱中的死細(xì)胞，但是在CP-1中冷凍的hMSC中幾乎沒(méi)有觀察到死細(xì)胞，并且?guī)缀鯖](méi)有觀察到所有死細(xì)胞。連接細(xì)胞(下圖中的B和C)。

　　[結(jié)論]由于干冰本身的溫度約為-80°C，因此我們認(rèn)為在CP-1High Grade中冷凍的hMSC可以使用干冰穩(wěn)定且長(zhǎng)期運(yùn)輸。

上一個(gè)：MS-9096V3D低吸附培養(yǎng)耗材